總氮分析儀的校準需遵循“先準備、后校準、再驗證”的邏輯，核心是通過標準物質(zhì)建立儀器響應(yīng)值與總氮濃度的對應(yīng)關(guān)系，確保檢測結(jié)果準確。以下是具體步驟（以常見的堿性過硫酸鉀消解-紫外分光光度法原理的總氮分析儀為例）：

 

一、校準前準備

 

儀器與試劑準備

 

確保儀器處于正常工作狀態(tài)：開機預(yù)熱（按說明書要求預(yù)熱30-60分鐘），檢查消解模塊溫度、紫外檢測器光源強度、進樣系統(tǒng)密封性等關(guān)鍵參數(shù)是否正常。

 

配制標準溶液：使用國家認可的總氮標準儲備液（如1000mg/LKNO?標準液），用無氨水逐級稀釋成至少3個濃度點的標準系列（濃度范圍需覆蓋日常檢測樣品的預(yù)期濃度，例如0.5mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L，空白為無氨水）。標準溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免污染。

 

準備輔助試劑：按儀器要求配制堿性過硫酸鉀溶液、鹽酸溶液（用于中和消解后樣品）等，確保試劑純度符合分析要求（如優(yōu)級純）。

 

樣品容器與系統(tǒng)清潔

 

校準用的比色管、進樣瓶需用鹽酸浸泡后，用無氨水反復(fù)沖洗干凈并烘干，避免殘留氮污染。

 

運行儀器的“管路清洗”程序，用無氨水沖洗進樣管路、消解管路和檢測池，去除前次檢測殘留。

 

二、校準操作步驟

 

1.空白校準（零點校準）

 

將無氨水作為空白樣品，按照儀器“空白測定”流程進樣：依次完成進樣、消解（通常120-124℃消解30分鐘）、冷卻、中和、比色（在220nm和275nm波長下測吸光度）。

 

儀器會自動記錄空白的吸光度值，并以此為基準扣除后續(xù)標準樣品和實際樣品的空白干擾，完成“零點校準”。若空白值過高（如吸光度＞0.030），需重新檢查無氨水純度、試劑污染或儀器管路清潔度。

 

2.標準曲線校準（核心步驟）

 

按濃度從低到高的順序，依次將標準系列溶液放入儀器進樣位，啟動“標準曲線測定”程序，儀器會自動對每個濃度點進行消解、比色，記錄對應(yīng)的凈吸光度值（220nm吸光度-2×275nm吸光度，消除有機物干擾）。

 

儀器內(nèi)置軟件會根據(jù)“濃度-凈吸光度”數(shù)據(jù)，通過線性回歸擬合生成標準曲線（要求相關(guān)系數(shù)R²≥0.999）。若某濃度點偏離曲線過遠（如殘差＞5%），需重新配制該濃度標準液并復(fù)測。

 

曲線生成后，儀器會保存曲線參數(shù)（斜率、截距），后續(xù)檢測時直接調(diào)用該曲線計算樣品濃度。

 

3.單點校準（輔助校準，適用于日?？焖衮炞C）

 

當(dāng)儀器已保存標準曲線，且僅需確認某一濃度范圍的準確性時，可選取一個接近樣品預(yù)期濃度的標準溶液（如樣品預(yù)計為3mg/L，選取2mg/L或5mg/L標準液）進行單點測定。

 

對比儀器測得的濃度值與標準溶液的真實濃度，若相對誤差≤±5%，則說明曲線有效；若誤差超范圍，需重新進行標準曲線校準。

 

三、校準后的驗證

 

質(zhì)控樣驗證

 

選取一瓶已知濃度的總氮質(zhì)控樣品（濃度需在標準曲線范圍內(nèi)，且與標準系列濃度不重疊），按樣品檢測流程測定，計算測定值與質(zhì)控樣標準值的相對誤差。若誤差≤±5%，證明校準合格；否則需排查標準溶液配制、儀器參數(shù)設(shè)置等問題，重新校準。

 

平行樣驗證

 

對同一標準濃度點進行2-3次平行測定，計算相對標準偏差（RSD）。若RSD≤3%，說明儀器精密度良好，校準結(jié)果可靠。

 

四、校準注意事項

 

校準頻率：新儀器首次使用前必須全范圍校準；日常使用時，建議每7-15天進行一次標準曲線校準，每次開機后進行空白校準；若儀器維修（如更換光源、消解模塊）或試劑批次更換后，需重新全范圍校準。

 

標準物質(zhì)溯源：必須使用有“國家標準物質(zhì)證書”的標準儲備液，避免使用自配的非溯源標準液，確保校準的標準性。

 

環(huán)境控制：校準過程中保持實驗室溫度（20-25℃）、濕度（40%-70%）穩(wěn)定，避免強光、振動干擾儀器檢測精度。

 

記錄留存：詳細記錄校準日期、標準溶液信息（批號、濃度）、儀器參數(shù)、標準曲線數(shù)據(jù)、質(zhì)控樣驗證結(jié)果等，建立校準檔案，以備追溯。